定西市人民检察院创建于1951年2月，初称甘肃省检察署定西专区分署，1954年9月更名为甘肃省人民检察院定西分院，文化大革命开始后遭到破坏。1978年7月恢复重建为甘肃省人民检察院定西分院。2003年9月最高人民检察院批准设立甘肃省定西市人民检察院。2017年11月，在国家监察体制改革中，市检察院反贪污贿赂、反渎职侵权、职务犯罪预防机构、职能及人员转隶至市纪委监委。2019年6月，市检察院全面完成内设机构改革，设置办公室、第一至第八检察部、法律政策研究室、案件管理办公室、检察技术信息处、检务督察处（巡察工作领导办公室）、计划财务装备处、政治部（保留法警支队牌子）等15个职能部门和机关党总支。

定西市人民检察院是国家的法律监督机关，主要任务是通过行使检察权，追诉犯罪，维护国家安全和社会秩序，维护个人和组织的合法权益，维护国家利益和社会公共利益，保障法律正确实施，维护社会公平正义，维护国家法制统一、尊严和权威，保障中国特色社会主义建设的顺利进行。市人民检察院行使下列职权：

（一）依照法律规定对有关刑事案件行使侦查权；

（二）对刑事案件进行审查，批准或者决定是否逮捕犯罪嫌疑人；

（三）对刑事案件进行审查，决定是否提起公诉，对决定提起公诉的案件支持公诉；

（四）依照法律规定提起公益诉讼；

（五）对诉讼活动实行法律监督；

（六）对判决、裁定等生效法律文书的执行工作实行法律监督；

（七）对监狱、看守所的执法活动实行法律监督；

（八）法律规定的其他职权。